- Docente: Monica Forni
- Crediti formativi: 6
- SSD: VET/02
- Lingua di insegnamento: Italiano
- Moduli: Monica Forni (Modulo 1) Maria Laura Bacci (Modulo 2)
- Modalità didattica: Convenzionale - Lezioni in presenza (Modulo 1) Convenzionale - Lezioni in presenza (Modulo 2)
- Campus: Bologna
- Corso: Laurea in Biotecnologie (cod. 8005)
Conoscenze e abilità da conseguire
Al termine del corso, lo studente conosce le basi della Scienza dell'Animale da Laboratorio e delle problematiche legate alla sperimentazione animale nonché delle modalità alternative all'utilizzo di animali da esperimento nella ricerca biomedica. In particolare, lo studente conosce in maniera approfondita la gametogenesi maschile e femminile, il processo della fecondazione, lo sviluppo embrionale fino allo stadio pre-impianto; conosce le più recenti biotecnologie riproduttive, compresa la transgenesi animale. Al termine del laboratorio, lo studente acquisisce le competenze necessarie a mettere in pratica un protocollo di maturazione, fecondazione e coltura in vitro di gameti ed embrioni animali. Lo studente è inoltre in grado di avere autonomia di giudizio rispetto alla corretta pianificazione di esperimenti che coinvolgono gli animali, reperire dal web informazioni sulle procedure sperimentali e sui metodi alternativi, avere abilità comunicative rispetto alle opinioni correnti relative alla sperimentazione animale.
Contenuti
Il corso consiste di una parte teorica e di una parte
pratica.
La prima parte teorica è dedicata alla Scienza dell'Animale da
Laboratorio, come disciplina base per approcciare la
sperimentazione che coinvolge gli animali (Prof Forni)
1. Aspetti etici e storici.
2. Metodi alternativi(regola delle
3R : Replacement, Reduction, Refinement)
3. Allevamento, cura e approccio corretto all'animale
4. Biologia delle principali specie di animali di interesse sperimentale
5. Etologia, stress, valutazione dello stato di benessere dell'animale e definizione della gamma di situazioni di impiego dell'animale entro cui tale stato viene conservato.
6. Standardizzazione genetica emicrobiologica
7. Quality management, good laboratory practices e Procedure Operative Standard
8. Modelli animali nella ricerca biomedica
In una seconda parte verranno affrontati gli aspetti
fondamentali della fisiologia riproduttiva e delle biotecnologie
applicate alla riproduzione degli animali d'allevamento, terrestri
ed acquatici.(Prof Bacci):
2. Femmina: Ovaie. Gametogenesi femminile. Oogenesi e follicologenesi. Ovulazione e formazione del corpo luteo.
3. Maschio: Testicoli. Gametogenesi maschile. Spermatozoi: caratteristiche e funzioni.
4. Embrioni: Fecondazione. Prime fasi di sviluppo embrionale (segmentazione e sviluppo della Blastocisti).
5. Gameti Femminili: raccolta in vivo ed ex vivo di oociti; valutazione qualitativa degli oociti; principali tecniche di accrescimento di oociti in vitro, maturazione in vitro, micromanipolazione di oociti, crioconservazione.
6. Gameti maschili: raccolta degli spermatozoi in vivo o ex vixo (epididimali); valutazione quali-quantitativa delle caratteristiche seminali, diluizione e conservazione degli spermatozoi mediante refrigerazione / congelamento / vitrificazione. Tecniche di fecondazione in vitro con seme fresco o congelato, inseminazione artificiale, fecondazione intrauterina laparotomica e laparoscopica. Sessaggio degli spermatozoi.
7. Embrioni: produzione e coltura di embrioni in vitro; raccolta di embrioni in vivo; embryotransfer; micromanipolazione degli embrioni; splitting embrionale; trasferimento nucleare; clonazione; stem cell; sessaggio degli embrioni. Transgenesi.
L'attività pratica di laboratorio utilizzerà come specie di riferimento quelle suina e bovina e consisterà in:
1. Gameti Femminili: raccolta ex vivo di oociti; valutazione qualitativa degli oociti alla raccolta; maturazione in vitro e sua valutazione dopo fissazione.
2. Gameti maschili: raccolta in vivo e/o ex vivo degli spermatozoi; valutazione quali-quantitativa delle caratteristiche seminali, diluizione e conservazione degli spermatozoi mediante refrigerazione. Valutazione delle caratteristiche funzionali.
3. La transgenesi animale mediante tecnica Sperm Mediated Gene Transfer: preparazione del mestruo disuitore, manipolazione del seme, uptake del DNA esogeno, valutazione mediante PCR dell'uptake del DNA.
Testi/Bibliografia
Appunti di lezione;
LFM van Zuphen, V Baumans, AC Beynen. La scienza dell'animale da
laboratorio. 1996, La Goliardica Pavese;
Reproduction in Farm Animals 7th edition, E. S. E. Hafez, B.
Hafez (Editors) 2000;
Lippincott Wlliams and Wilkins Dukes, Fisiologia degli animali
domestici, IDELSON-GNOCCHI, Napoli (2002).
Dispense di laboratorio con la descrizione operativa delle
esperienze.
Metodi didattici
Lezioni frontali e discussione
Attività di laboratorio eseguite personalmente dallo sttudente
secondo le dispense fornite, con spiegazioni teoriche e pratiche
del docente e dei tutor
Modalità di verifica e valutazione dell'apprendimento
La valutazione finale è volta a definire il conseguimento dei
seguenti obiettivi formativi:
- Conoscere le basi della Scienza dell'Animale da Laboratorio
- Avere autonomia di giudizio e abilità comunicative relativamente
alla sperimentazione animale
- Conoscere la gametogenesi maschile e femminile anche in vitro
- Conoscere le principali biotecnologie riproduttive
Il voto finale verrà così definito:
40% punteggio conseguito in un test in itinere composto da 32
domande chiuse sulla Scienza dell'animale da laboratorio che si
svolgerà al termine della prima parte del corso;
10% valutazione della partecipazione attiva alle attività di
laboratorio o di lavoro autonomo degli studenti;
5% valutazione della relazione prodotto sull'attività
di laboratorio di Biotecnologie della riproduzione (da inviare per
mail all'atto dell'iscrizione alla lista su alma esami);
45% accertamento orale sugli argomenti teorici trattati durante il
corso.
Strumenti a supporto della didattica
.ppt delle lezioni
Laboratori di bioinformatica, di colture cellulari, di
microbiologia e morfologico a posto singolo.
Orario di ricevimento
Consulta il sito web di Monica Forni
Consulta il sito web di Maria Laura Bacci