14040 - METODOLOGIE BIOCHIMICHE

Conoscenze e abilità da conseguire

Al termine del corso, lo studente possiede conoscenze approfondite di alcune delle metodiche attualmente più utilizzate nella biochimica e biologia cellulare, con particolare interesse alla purificazione ed identificazione di proteine, ai principi di spettroscopia di assorbimento e di fluorescenza, con applicazioni quali la microscopia confocale e la citometria a flusso. Inoltre lo studente conosce ed utilizza un programma di grafica molecolare, che consente di visualizzare strutture di proteine a risoluzione atomica. In particolare, lo studente è in grado di: - proporre le strategie sperimentali per affrontare diversi problemi biologici; - analizzare le strutture delle proteine.

Contenuti

• Purificazione delle proteine;
• Tecniche cromatografiche: principi e applicazioni;
• Elettroforesi di proteine: SDS-Page, elettroforesi bidimensionale e Blu-Native;
• Principi e applicazioni della spettrometria di massa;
• Introduzione alla Proteomica: principi di Interatomica e sue applicazioni;
• Elementi di cristallografia a raggi X e spettroscopia NMR;
• Principi di spettroscopia: spettroscopia nell'ultravioletto e visibile; 
• Fluorescenza: principi e applicazioni; utilizzo di sonde fluorescenti per lo studio di alcune funzioni cellulari; real-time imaging  (FRET e FRAP);
• Principi di microscopia: utilizzo e applicazioni biochimiche della microscopia ottica (microscopia ad epifluorescenza e confocale) e della microscopia elettronica; introduzione alla tecnica di tomografia;
• Principi del programma Deep-View:  la visualizzazione grafica della struttura atomica di proteine.

Le ore di laboratorio prevedono l'apprendimento e l'uso di Deep-View, come esempio di un programma di visualizzazione grafica di strutture a risoluzione atomica di proteine, e lo studio di alcune strutture proteiche rilevanti.

Testi/Bibliografia

Wilson K. - Walker J. “Biochimica e biologia molecolare: principi e tecniche” editore Raffaello Cortina.

Brandén C. - Tooze J. “Introduzione alla struttura delle proteine” editore Zanichelli

 

Metodi didattici

Lezioni frontali e lavoro individuale al calcolatore degli studenti.

Modalità di verifica e valutazione dell'apprendimento

Esame orale e test utilizzando il PC.

Strumenti a supporto della didattica

Videoproiettore e PC

Orario di ricevimento

Consulta il sito web di Anna Maria Porcelli