28452 - LABORATORIO DI CULTURE CELLULARI

Conoscenze e abilità da conseguire

Al termine del modulo, lo studente conosce e sa realizzare: - le corrette procedure per il lavoro in condizioni sterili e le principali tecniche di base per le colture cellulari animali; - un protocollo semplice per valutare effetti antiproliferativi e/o citotossici. Lo studente inoltre sa valutare criticamente i risultati ottenuti tramite la stesura, sotto la guida del docente e dei tutors, di una relazione riguardante gli esperimenti effettuati.

Contenuti

Programma del Corso di Laboratorio di Colture Cellulari

Parte teorica.

1. Il laboratorio di colture cellulari animali e le principali attrezzature utilizzate.
2. La sicurezza nelle colture cellulari
3. I principali tipi di colture e i terreni per le colture cellulari
4. La crioconservazione
5. Le contaminazioni
6. Le basi teoriche delle applicazioni delle tecniche centrifugative, microscopiche e citofluorimetriche nelle colture cellulari.

Parte pratica

1. Allestimento di una curva di crescita utilizzando una coltura in sospensione e determinazione del tempo di duplicazione della coltura
2. Coltura di cellule adese
3. Determinazione del ciclo cellulare mediante tecniche citofluorimetriche
4. Preparazione di vetrini mediante citocentrifuga o per crescita diretta su vetrino e colorazioni selettive in microscopia a luce trasmessa
5. Congelamento e scongelamento di cellule animali
6. Preparazione di lisati cellulari

Testi/Bibliografia

Schede con la descrizione dettagliata delle procedure da seguire durante il laboratorio.

Testo di riferimento consigliato: Freshney R.I., Culture of Animal Cell. Manual of Basic Techniques, 4th ed., Wiley-Liss, 2000.

Metodi didattici

Laboratori pratici che permetteranno di acquisire le principali tecniche descritte nella parte teorica.

Modalità di verifica e valutazione dell'apprendimento

Relazione sulle esperienze fatte in laboratorio, ed in particolare determinazione della curva di crescita e del tempo di duplicazione delle cellule utilizzate e dei risultati ottenuti con le diverse tecniche utilizzate per valutare la vitalita' e la funzionalita' delle cellule.

Accertamento finale orale con discussione della relazione stessa.

Strumenti a supporto della didattica

Le lezioni sono supportate dalla proiezione di lucidi e di presentazioni in power point. La parte pratica si avvale del laboratorio di colture cellulari, del laboratorio di microscopia, del laboratorio di informatica.

Link ad altre eventuali informazioni

http://www.biotecnologie.unibo.it/cgi-bin/corsi.pl

Orario di ricevimento

Consulta il sito web di Giovanna Farruggia